细胞冻存,是指将细胞贮存在超低温环境中,在需要的时候再进行复苏。
冻存原则为“慢冻”,即让细胞在缓慢降温的条件下逐渐冷冻。
如果直接将细胞悬液放在超低温下快速冷冻,细胞会受到冷冻损伤而死亡。在冻存液中添加的保护剂(如DMSO、甘油)和在冻存盒中添加的异丙醇,都起到程序性降温的作用。
DMSO能够快速穿透细胞膜进入细胞中,延缓温度下降速度,减少细胞内冰晶的形成,从而起到保护细胞的作用。
需注意的是,DMSO溶于培养基时,将释放大量热量,所以冻存液需提前配制,不能直接将DMSO加入含有细胞的培养基中,避免烫伤细胞。
另外,DMSO属于致癌物质,使用时应戴好手套,规范操作。
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