一些成熟细胞相比，干细胞的体外培养条件要求相对苛刻，因为它在体外培养条件下容易自然分化而失去干细胞的基本特性。
干细胞的体外培养难点是既要维持干细胞的“干性”，又要令其增殖而保持未分化状态。
由于不同来源的干细胞，其生长特性差异较大，体外培养条件也有一定差别，一般需要根据不同类型的干细胞建立相应的个性化培养体系，特别是将某种干细胞建成细胞系，更需要建立稳定的培养技术。
体外制备干细胞包括干细胞或富含干细胞的材料采集、分离纯化、扩增、鉴定及储存等过程，分离、培养过程需要在无菌层流实验室中进行，需要在培养体系中添加一些维持其“干性”和促进增殖的因子。
