免疫细胞化学技术有多种染色方式,根据标记物的种类可分为免疫荧光法、免疫酶标法、免疫铁蛋白法及免疫胶体金法等。
其中,免疫荧光法结合激光共聚焦扫描显微镜技术,大大提高了检测的分辨率,可以更为精确地检测抗原的细胞定位及分布。
免疫荧光技术是先将已知的抗原或抗体标记上荧光素,再用这种荧光抗体(或抗原)作为探针检查细胞或组织内相应抗原(抗体)。
在细胞中形成的抗原抗体复合物上含有标记的荧光素,受激发光照射后,由低能态进入高能态,而高能态的电子是不稳定的,以辐射光量子的形式释放能量后,再回到原来的低能态的过程中可以发出明亮的荧光,利用荧光显微镜可看见荧光所在的细胞或组织,从而确定抗原或抗体的性质和定位,并可以利用定量技术测定含量。